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ポリオの診断方法には、便などの検体からウイルスの存在を確かめる方法（ウイルス分離）と血液中の抗体の有無を調べる方法（血清診断）があります。糞便検体を用いたウイルス分離が確定診断に用いられ、補助的に血清診断を行うことが一般的です。
また、ポリオウイルスが野生株かワクチン由来株かを調べる検査も行います。
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